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Cellworld DMEM培養基的配製方法你知道麽

更新時間:2023-03-13  |  點擊率:771
  Cellworld DMEM培養基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養基,高糖型有利於細胞停泊於一個位置生長,適於生長較快、附著較困難腫瘤細胞等。
 
  該類培養基廣泛應用於疫苗生產和各種初代病毒宿主細胞的細胞培養及單一細胞培養;如A9、3T6、BALB/3T3、COS-1、COS-3、COS-7、L6、WEHI-3b等細胞係的培養。
 
  Cellworld DMEM培養基的配製方法:
 
  1 製備新鮮三蒸水或Millipore超純水。
 
  2 稱取所需量的幹粉培養基,加入約終體積一半的三蒸水中;若配製一個包裝的培養液,在將整個包裝的幹粉倒入三蒸水後,需用水洗包裝袋內麵2次,倒入培養液中,以保證所有幹粉都溶解成培養液。磁力攪拌或人工攪拌使之溶解。
 
  3 根據包裝袋上的要求補加所需量的碳酸氫鈉;根據實驗需要,添HEPES(5-20mmol/L)、穀氨酰胺和其他特殊物質。
 
  4 加水定容到終體積。
 
  5 必要時用1 mol/L 鹽酸和1 mol/L 氫氧化鈉調節pH。
 
  6 用無菌0.22um濾膜過濾除菌,分裝於無菌血清瓶中,4℃冰箱保存。
 
  配製好的培養液用前加入100U/mL青黴素和100U/mL鏈黴素,並根據需要加入血清(5%-20%)。
 
  Cellworld DMEM培養基的特點:
 
  (1)氨基酸含量為依格爾培養基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等;
 
  (2)維生素含量為依格爾培養基的4倍;
 
  (3)含有糖酵解途徑中的重要物質——丙酮酸;
 
  (4)含有微量的鐵離子。
 
  DMEM培養基應用廣泛。基於DMEM培養基中氨基酸、微生物含量豐富,並具有糖酵解中的丙酮酸和微量Fe離子,因此在細胞培養、疫苗生產等方麵的應用最為常見。
 
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